βοηθά τη συνεδρίαση της υποεπιτροπής για την έρευνα για τα εμβόλια

Σύνοψη συναντήσεων

Εισαγωγικά σχόλια

Η υποεπιτροπή έρευνας για το εμβόλιο κατά του AIDS (AVRS) συναντήθηκε σε δημόσια συνεδρίαση στις 22-23 Μαΐου 2007 στην αίθουσα συνεδριάσεων 2C-13 στο 10401 Fernwood Drive, Bethesda, MD.

Τα μέλη του AVRS παρουσιάζουν: τον Eric Hunter (πρόεδρο), τον James Bradac (εκτελεστικό γραμματέα), τον Jay Berzofsky (ex officio), τον Larry Corey, τον Susan Buchbinder, τον Kevin Fisher, τον Barton Haynes (ex officio), τον Paul Johnson, τον Jeffrey Lifson, τον Margaret Liu, McElrath, Timothy Mastro (ex officio), Bonnie Mathieson (ex officio), Nelson Michael (ex officio), Γκάρυ Νάμπελ (ex officio), Louis Picker, Jerald Sadoff, Ian Wilson. Τα μέλη δεν είναι παρόντα: η Νίνα Ράσελ.

Ετήσια Έκθεση CHAVI

Το προσωπικό της ομάδας συμμετείχε

DAIDS πρόγραμμα έρευνας και σχεδιασμού εμβολίων HIV (HIVRAD)

Ηχεία

Ο Δρ Hunter υποδέχθηκε τους συμμετέχοντες και εισήγαγε τρία νέα μέλη της υποεπιτροπής: Kevin Fisher, Jeffrey Lifson και Louis Picker. Ζήτησε από άλλους συμμετέχοντες να παρουσιαστούν (βλ. Συνημμένο κατάλογο).

Ο Stuart Shapiro, υπεύθυνος προγράμματος, CHAVI, περιέγραψε τη CHAVI ως συμβολή του προγράμματος εμβολίων στην Global Vaccine Enterprise. Ο CHAVI επιχειρεί να αντιμετωπίσει μεγάλες εκκρεμείς ερωτήσεις με τη χρήση μεγάλων κοόρτων, δοκιμών υψηλής απόδοσης και μεγάλων βάσεων δεδομένων. Το CHAVI δεν ανταγωνίζεται τις επιχορηγήσεις R01 και P01, αλλά τις συμπληρώνει.

Ο Bart Haynes, διευθυντής της CHAVI, ανέφερε ότι το CHAVI βρίσκεται στο τέλος του έτους 2 με 94 ερευνητές σε 51 τοποθεσίες, συμπεριλαμβανομένων 13 κλινικών χώρων, και ένα κεντρικό κέντρο δεδομένων στο Πανεπιστήμιο της Ουάσινγκτον. Υπάρχουν 12 πρωτόκολλα που βρίσκονται σε εξέλιξη, με επίκεντρο τους συσχετισμούς της ασυλίας σε τέσσερις πληθυσμούς

Ο CHAVI επικεντρώνεται επί του παρόντος σε πέντε κρίσιμες ερωτήσεις

Ο David Goldstein εξήγησε ότι υπάρχουν περίπου 10 εκατομμύρια κοινές παραλλαγές στο ανθρώπινο γονιδίωμα, οι περισσότεροι από τους οποίους είναι πολυμορφισμοί ενός νουκλεοτιδίου (SNPs) και μερικές από αυτές τις SNP συμβάλλουν στη σημαντική μεταβλητότητα στον ιικό έλεγχο που έχει σοβαρές συνέπειες για την έκβαση της λοίμωξης από HIV (ταχείες προόδους, φυσιολογικοί ασθενείς, αργά προχωρημένα άτομα και “ελεγκτές ελίτ” που σπάνια προχωρούν σε πλήρες AIDS). Το CHAVI διεξάγει μελέτες σύνδεσης με όλο το γονιδίωμα για τον εντοπισμό των γενετικών παραλλαγών που σχετίζονται με αυτούς τους φαινοτύπους. Η γονλοτυπία πάνω από 550.000 SNPs έχει εντοπίσει δύο SNPs με επίδραση σε γονιδίωμα σε ιικό σημείο αναφοράς, δηλαδή το σύμπλοκο HLA H5 (HCP5) και την HLA-C 5-prime περιοχή. Ο πρώτος συνδέεται με τον HLA-B5701, ο οποίος έχει μια γνωστή συσχέτιση με τον περιορισμό του HIV και ο τελευταίος επηρεάζει τα επίπεδα έκφρασης του mRNA του HLA-C. και οι δύο παρέχουν καλύτερο έλεγχο της αντιγραφής του HIV. Η ανάλυση εξέλιξης επιβεβαίωσε ότι αυτά τα SNPs έχουν σημαντική επίδραση στον χρόνο έως τον αριθμό των CD4 κάτω από 350. Άλλες αναλύσεις υποδεικνύουν ότι αυτά τα δύο SNPs μπορούν να εξηγήσουν έως και 15 τοις εκατό των μεταβολών στο ιικό σημείο αναφοράς.

Απαντώντας σε ερωτήσεις, ο Goldstein πρόσθεσε ότι χρειάζεται μια μεγάλη ομάδα – περίπου 2.000 δείγματα – για τον εντοπισμό των SNPs ενδιαφέροντος. Η ομάδα για τις δοκιμές του εμβολίου Merck είναι περίπου 5.000 και μπορεί να είναι επιθυμητό να χρησιμοποιηθούν δείγματα από τη δοκιμή για αυτή την ανάλυση. Η CHAVI αναπτύσσει ένα διαφορετικό τσιπ για να μελετήσει τις διακυμάνσεις των πληθυσμών στις αναπτυσσόμενες χώρες. Μέσα σε 18 μήνες, οι ερευνητές ελπίζουν να εντοπίσουν πρόσθετα SNP που εξηγούν μέχρι 50 τοις εκατό της διαφοράς στο σημείο αναφοράς.

Ο Joseph Sodroski περιέγραψε τις προσπάθειες του CHAVI για την εξεύρεση επιφανειών πρωτεϊνών επιφανείας που είναι εκτεθειμένες και διατηρημένες και, συνεπώς, παρουσιάζουν στόχους για NAbs. Ο ιός HIV έχει αναπτύξει μεταβλητούς βρόχους και άλλα χαρακτηριστικά που ελαχιστοποιούν την επίδραση του Abs, τα περισσότερα από τα οποία εξουδετερώνουν ασθενώς. Εν τούτοις, το β12 Ab είναι ισχυρώς εξουδετερωτικό και απαιτεί μικρή αλλαγή της εντροπίας να προσδένεται στη θέση πρόσδεσης του CD4 πάνω στην ιϊκή gp120. Η θέση σύνδεσης b12 είναι επίσης καλά συντηρημένη σε διαφορετικά στελέχη SHIV και HIV. Τα πειράματα έχουν επίσης αποδείξει ότι το b12 αναγνωρίζει πολλαπλές διαμορφώσεις του HIV-1gp120, τους σταθεροποιεί σε μια πιο σταθερή μορφή που αναγνωρίζεται πιο εύκολα και δεσμεύεται από άλλα NAbs. Οι μελλοντικές προσπάθειες θα αναζητήσουν παρόμοιες δομές της gp41-διαδραστικής επιφάνειας της gp120, καθώς και γενικά απαντήσεις NAb στους ορούς επιλεγμένων ατόμων HIV +.

Σε απάντηση σε ερωτήσεις, ο Sodroski είπε ότι οι ερευνητές είχαν εξετάσει παραλλαγές στον επίτοπο b12 παρά στις γύρω περιοχές που αλλοιώνουν την πρόσβαση στη θέση δέσμευσης. Συμφώνησε ότι θα ήταν πολύτιμο να επικεντρωθούμε πιο στενά στη δομή του μεταδιδόμενου ιού, που πιθανώς θα είναι ο στόχος ενός επιτυχούς εμβολίου.

Ο Bart Haynes περιέγραψε τις προσπάθειες να μελετηθούν οι αποκρίσεις Ab στα πρώτα στάδια της οξείας λοίμωξης από τον ιό HIV (AHI). Πρόσφατες έρευνες έχουν δείξει ότι η μετάδοση του ιού λαμβάνει χώρα 12-21 ημέρες πριν από την εμφάνιση ιών και έως 20 εβδομάδες πριν από την εμφάνιση αυτόλογων NAbs. Ως εκ τούτου, η ανάγκη μελέτης του Abs, τόσο εξουδετερωτικών όσο και μη εξουδετερωτικών, που εμφανίζονται σύντομα μετά την ιογενή άνοδο. Αντίθετα με άλλες ιογενείς ασθένειες, ωστόσο, οι αποκρίσεις Ab σε HIV καθυστερούν και οι ερευνητές υποψιάζονται ότι τα ιολογικά συμβάντα μπορεί να ρυθμίζουν τις αντιδράσεις Ab συγκεκριμένου Env. Η αλλαγή τάξης είναι μια πιθανότητα – όλα IgG, IgM και IgA αυξάνονται ταυτοχρόνως (ένα ανυπέρβλητο φαινόμενο), αλλά τα IgM και IgA πέφτουν και τα δύο δεν είναι προστατευτικά.

Οι ερευνητές σήμερα στερούνται τα κύτταρα για να εξετάσουν αυτά τα γεγονότα, αλλά θα έχουν τα δείγματα που χρειάζονται από το CHAVI001. Η τρέχουσα υπόθεση τους είναι ότι το Ηΐν επάγει μια τεράστια απόπτωση πριν και κατά τη διάρκεια της ιογενούς ράμπας και ότι τα μικροσωματίδια πλάσματος (θραύσματα αποπτωτικών CD3 και Τ κυττάρων) έχουν κατασταλτική επίδραση στην παραγωγή Ab, ενισχύοντας έτσι τον αποπτωτικό καταρράκτη. Για να αντισταθμιστεί αυτό το αποτέλεσμα, αυτό που χρειάζεται είναι η απόκριση Β κυττάρων που έρχεται σε ώρες ή ημέρες, είτε από έμφυτα είτε από περιθωριακά Β κύτταρα, που θα είναι σε θέση να αποτρέψουν ή να περιορίσουν τη μαζική απόπτωση που οδηγεί σε ανοσοκαταστολή. Οι τρέχουσες μελέτες σχεδιάζονται για να απομονώσουν ανοσολογικά σύμπλοκα προκειμένου να προσδιοριστεί το ανοσολογικό ρεπερτόριο και να δημιουργηθούν πολυειδικά Β κύτταρα.

Σε απάντηση σε ερωτήσεις, ο Haynes είπε ότι ο συγχρονισμός της πραγματικής λοίμωξης είναι άγνωστος, αλλά φαίνεται ότι ακολουθεί μετάδοση από 11 έως 28 ημέρες. Οι Macaques αναπτύσσουν μόλυνση πιο γρήγορα από τους ανθρώπους, αλλά λαμβάνουν επίσης ένα πολύ μεγαλύτερο innoculus. Τα στοιχεία δείχνουν ότι η ανάγκη για NAbs είναι συστηματική, όχι σε τοπικούς ιστούς, αλλά πολλά ακόμη πρέπει να μάθουν για τη φυσική ιστορία του HIV και τη βιολογία της βλεννογόνου απόκρισης. Για παράδειγμα, υπάρχει μια διαφορά μεταξύ της “απόπτωσης εκκίνησης” και της “παθολογικής απόπτωσης”;

Ο Γιώργος Shaw παρατήρησε ότι η μετάδοση του HIV είναι μια αναποτελεσματική διαδικασία που είναι δύσκολη ή αδύνατη να μελετηθεί άμεσα. Η εναλλακτική λύση είναι να μελετηθεί το Env ή ολόκληρο το πρωτεόνο σε μεγάλο αριθμό ασθενών κατά τη διάρκεια των 14 έως 28 ημερών μεταξύ της μετάδοσης και της ιογενής απογείωσης. Μία μελέτη 103 ασθενών με ΑΗΙ από την ομάδα Β, 50 από αυτές της φάσης 1 ή 2, έδωσε 2.590 δείγμα για προσδιορισμό αλληλουχίας με ανάλυση μεμονωμένου γονιδιώματος. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι περισσότερες αλληλουχίες διέφεραν από μηδέν, ένα ή το πολύ SNPs. οι περισσότεροι ασθενείς (77 από 93) έδειξαν ένα μόνο στέλεχος, αλλά μερικά (19) έδειξαν δύο στελέχη και μερικά (13) εμφάνισαν ανασυνδυασμένα στελέχη. Οι ερευνητές συνήγαγαν από αυτό ότι, εκπληκτικά, το ιικό Env είναι ταυτόσημο με τον μεταδιδόμενο ιό για 14 έως 42 ημέρες μετά τη μετάδοση, ότι ο μεταδιδόμενος Env θα εξακολουθεί να είναι ένας αποτελεσματικός στόχος κατά τη στιγμή της αιχμής της ιαιμίας και ότι (κατ ‘επέκταση) η αλληλουχία στην κορυφαία ιαιμία θα είναι ίδια με τον μεταδιδόμενο ιό. Περαιτέρω ανάλυση έδειξε ότι οι μεταδιδόμενες ασπίδες του ιού V3 αλλά εμφανίζουν το R5, το οποίο καθιστά το R5 λογικό στόχο εμβολίου.

Σε απάντηση σε ερωτήσεις, Shaw πρόσθεσε ότι το 80 τοις εκατό των κλινικών λοιμώξεων, η πηγή είναι ένα μόνο ιικό σωματίδιο. Οι παρατηρούμενοι ανασυνδυασμοί εμφανίστηκαν στον ξενιστή και όχι στον δότη – αν και ο εντόμος είναι φαινοτυπικά αναμεμειγμένος, η ίδια η λοίμωξη είναι ένα σπάνιο γεγονός (από τη σειρά ενός στα 104 ή 105) και επιτυγχάνεται με ένα ή δύο περισσότερα βιριόντα, μετά τα οποία υπάρχει μικρή ή καθόλου γενετική μετατόπιση. Δεν υπάρχουν δύο ξενιστές που θα έχουν ταυτόσημες αλληλουχίες ιού, ωστόσο, επειδή θα έχουν μολυνθεί από διαφορετικά ιοσωμάτια. Η αναπαραγωγή του HIV διαρκεί 4 ή 5 ημέρες. Θα ήταν χρήσιμο να επαναληφθεί αυτή η μελέτη με το SHIV. Είναι δύσκολο να εξαχθούν ευρύτερα συμπεράσματα διότι οι ερευνητές δεν είχαν προσωπικά δεδομένα (όπως οι συμπεριφορές κινδύνου) και συχνά δεν γνώριζαν το φύλο του ασθενούς από τον οποίο λήφθηκαν τα δείγματα.

Η Bette Korber αναφέρθηκε σε μια σχετική προσπάθεια ταυτοποίησης του πιο πρόσφατου κοινού προγόνου (MRCA) των φαινοτύπων του ιού σε 102 πρώιμους ασθενείς με ΑΗΙ από την ομάδα Β. Εδώ και πάλι 79 από τους 102 ασθενείς ήταν ομοιογενείς, με ελάχιστη ή καθόλου γενετική ποικιλότητα σε 17 ημέρες από τη μετάδοση , αλλά οι πιο ετερογενείς ασθενείς εμφάνισαν κορυφές με διαφορές μικρότερες από 10 και μεγαλύτερες από 100 ζευγών βάσεων – μια ποικιλία που εξηγείται καλύτερα από περισσότερους από έναν μεταδιδόμενους ιούς. Στην πραγματικότητα, η μεγάλη ποικιλομορφία των δειγμάτων υπερμετασχηματισμού υποδηλώνει ότι έλαβαν μια «βόλτα ετερογένειας» και τα καθιστούν άξια περαιτέρω μελέτης (υπάρχει πολύ μεγαλύτερη ανομοιογένεια σε περιπτώσεις οξείας HIV). Οι λύσεις μοντελοποίησης από τους υπερυπολογιστές Los Alamos παρήγαγαν φυλογενετικά δέντρα με βάση την υπογραφή, με ανάλυση πλήρους γονιδιώματος για τη μείωση του θορύβου και των ψευδών θετικών και αρνητικών. Τα “πιο δυνατά” πεπτίδια σήματος ήταν στις θέσεις 18 και 29, με άλλες υπογραφές διασκορπισμένες. Απαιτείται περαιτέρω επικύρωση για ένα δεύτερο σύνολο δεδομένων και υπάρχουν σχέδια να επαναληφθεί αυτή η μελέτη με δείγματα C clade προκειμένου να μελετηθεί η εξέλιξη του HIV.

Ο Andrew McMichael ανέφερε σχετικά με τις μελέτες CHAVI σχετικά με τις αποκρίσεις των Τ κυττάρων που σχετίζονται με τον ιό HIV χρησιμοποιώντας αναλύσεις που παρέχουν βελτιωμένη ευαισθησία διατηρώντας παράλληλα την εξειδίκευση. Προηγούμενες μελέτες άφησαν αβεβαιότητες ως προς το επίπεδο έκθεσης. αυτή η μελέτη περιελάμβανε ερωτηματολόγια συμπεριφοράς. Ορολογικές ανιχνεύσεις για αποκρίσεις κυτοκίνης αποκάλυψαν ότι τα επίπεδα ΙΡΝ-άλφα και IL15 αυξάνονται νωρίς, ενώ τα ΤΝΡ-άλφα, IL18 και IL10 αυξάνονται αργότερα. Οι αποκρίσεις Τ κυττάρων στον Ηΐν είναι αρκετά διαφορετικές από εκείνες άλλων ιικών λοιμώξεων στους ανθρώπους. Τα δενδριτικά κύτταρα ενεργοποιούνται στα πρώιμα στάδια της μόλυνσης, ενώ τα φυσικά κύτταρα φονιάς (ΝΚ) ενεργοποιούνται περίπου ένα μήνα μετά τη μέγιστη ιαιμία και 2 μήνες μετά τη μόλυνση. Η εργασία θα επικεντρωθεί τώρα στις απαντήσεις στον μεταδιδόμενο ιό, που εργάζεται προς τα πίσω από τη χρόνια λοίμωξη στο AHI. Τα αποτελέσματα μέχρι τώρα έδειξαν ότι η αρχική απόκριση των κυττάρων Τ είναι εξ ολοκλήρου CD8, η οποία διευρύνεται σημαντικά μεταξύ του μήνα 1 και του μήνα 6. Το HLA-C διαδραματίζει βασικό ρόλο στην πρώιμη απόκριση, αλλά οι απόκρισεις των κυττάρων Τ + 4 κυττάρων απουσιάζουν. Οι ερευνητές θα επαναλάβουν τώρα τη μελέτη με δείγματα από το CHAVI001, με στόχο να προσδιορίσουν το είδος της απόκρισης των κυττάρων Τ που οδηγεί στην προστασία.

Σε απάντηση σε ερωτήσεις, ο McMichael πρόσθεσε ότι η ποιότητα του δείγματος είναι περισσότερο πρόβλημα με την κυτταρομετρία ροής, η οποία παράγει καλύτερα αποτελέσματα με φρέσκα δείγματα. Οι κλινικές θέσεις CHAVI προσπαθούν να καταψύξουν τα δείγματα εντός 3 ή 4 ωρών και η QA έχει δείξει ότι το 90 τοις εκατό από αυτά είναι βιώσιμα στην απόψυξη. Γενικά, το προφίλ του μήνα 1 εμπλουτίζεται στον μήνα 6, αλλά κανένα από τα συστατικά δεν εξαφανίζεται. οι ερευνητές σαρώνουν διαμήκως για να αναζητήσουν ιογενή διαφυγή.

Ο Norm Letvin επανεξέτασε τα αποτελέσματα αρκετών μελετών σε ζώα που διεξήχθησαν τους τελευταίους μήνες, μελετώντας την κανονική μόλυνση, την επιμόλυνση και το εξασθενημένο από ζωντανό εμβόλιο για το SIV σε πρωτεύοντα πλην του ανθρώπου (ΝΗΠ). Προκαταρκτικές μελέτες του ρόλου των κυττάρων ΝΚ, CD8 + Τ και Β κυττάρων στον έλεγχο της φυσικής λοίμωξης αποκάλυψαν ότι τα CD8 + χάνονται λόγω της απώλειας των κυττάρων στόχων στην γαστρεντερική οδό και ότι η μείωση του CD8 + αύξησε τόσο το φορτίο κορυφής κατά τη διάρκεια της ιαιμίας όσο και την επακόλουθη ιική σημείο αναφοράς, με αρνητικές επιπτώσεις στην επιβίωση. Αυτό υπογραμμίζει τη ζωτική σημασία των Τ κυττάρων CD8 + στον έλεγχο SIV. Η μείωση των ΝΚ κυττάρων, από την άλλη πλευρά, δεν έχει καμία επίδραση στο κορυφαίο ιικό φορτίο ή στο ιικό σημείο αναφοράς και η μείωση των Β κυττάρων δεν έχει επίδραση στο ιικό φορτίο, αν και μειώνει τον τίτλο Ab. Οι ερευνητές υποψιάζονται ότι κάποια προϋπάρχουσα απόκριση μπορεί να είναι προστατευτική στο AHI.

Χρησιμοποιώντας ένα μοντέλο υπερφυσιολογίας NHP (μόλυνση ενός HIV + ασθενούς με ένα δεύτερο στέλεχος του HIV), οι ερευνητές εξέτασαν την υπόθεση ότι η προηγούμενη λοίμωξη παρέχει τουλάχιστον μερική προστασία έναντι μεταγενέστερης έκθεσης. Οι πιθήκους SIV + προκλήθηκαν με ετερόλογο SIV σε έξι εβδομαδιαίες εκθέσεις. σε 12 από τις 14 περιπτώσεις, το προηγουμένως μολυσμένο ζώο περιείχε πρόσθετες προκλήσεις και 2 ζώα αντιστάθηκαν εξ ολοκλήρου. Το ιικό φορτίο αυξήθηκε κατά 50 έως 100 τοις εκατό, σε σύγκριση με μια επταπλάσια αύξηση στην πρώτη λοίμωξη και δεν υπήρξε συσχέτιση με CD4 +, κυτοκίνες ή ιολογικούς παράγοντες. Τα ίδια ζώα που αντιστάθηκαν σε επιπρόσθετες λοιμώξεις είχαν επίσης την κύρια μόλυνση. Πολλά ίδια αποτελέσματα ελήφθησαν με ζωντανό εξασθενημένο εμβόλιο – περιελάμβανε επακόλουθη πρόκληση, παράγοντας χαμηλότερη κορυφή ιού και σημείο αναφοράς, αλλά δεν υπήρχε αποστείρωση. Αυτό μπορεί να είναι ένα χρήσιμο μοντέλο για τη μελέτη των συσχετισμών της ανοσίας.

Ο Norm Letvin επέστρεψε για να συζητήσει την ποικιλία γονιδίων Env άγριου τύπου, η οποία έχει σοβαρές επιπτώσεις στη στρατηγική VRC για την ανάπτυξη εμβολίων πολλαπλών επιπέδων. Η προσέγγιση του κεντρικού γονιδίου περιλαμβάνει μεγάλο μέρος αυτής της ποικιλομορφίας χρησιμοποιώντας μια συναινετική αλληλουχία που μειώνει την «απόσταση» από οποιοδήποτε σύγχρονο ιό. Θεωρητικά, η συναίνεση του “Συγκροτήματος Μ” – η οποία περιλαμβάνει συντηρημένους λειτουργικούς, αντιγονικούς και εξουδετερωτικούς επίτοπους – θα πρέπει να αναγνωρίσει περισσότερες παραλλαγές και να προκαλέσει περισσότερα NAbs από οποιαδήποτε μονήρη Ag. Για να δοκιμαστεί αυτή η έννοια, τρεις ομάδες ΝΗΡ εγχύθηκαν με ψευδείς, ειδικές (clade Β) και συναινετικές εκδοχές του εμβολίου ϋΝΑ prime + Ad5 / env boost και στη συνέχεια προκλήθηκαν με δέκα διαφορετικά στελέχη του Ηΐν για να δοκιμαστεί το εύρος της αντιδραστικότητας. Η χαρτογράφηση επιτόπιων έδειξε ότι, ενώ η ανοσοποίηση με το Ende Β προκαλεί μια ειδική απάντηση Β, η ανοσοποίηση με συναινετική Env προκαλεί μια απόκριση με ευρύτερη εξειδικευμένη διασταύρωση – μια τριπλάσια ή τετραπλάσια αύξηση στον αριθμό των επιτόπων που αναγνωρίζονται και μια σημαντική υψηλότερος τίτλος Ab. Σε εκκρεμούσες μελέτες θα δοκιμαστεί η επίδραση του εντέρου Β σε σχέση με την αύξηση της ομοφωνίας και θα χαρακτηριστεί η απόκριση NAb που προκαλείται από το εμβόλιο μετά την ώθηση.

Σε απάντηση σε ερωτήσεις, η Letvin δεν μπόρεσε να σχολιάσει την ποιότητα αυτής της ανοσολογικής αντίδρασης – οι ερευνητές είχαν υπολογίσει μόνο τον αριθμό των επιτόπων που αναγνωρίστηκαν. Ούτε θα μπορούσε να σχολιάσει τα “καυτά σημεία” στην αναγνώριση πεπτιδίων Env, όπως η Nef, καθώς οι ερευνητές δεν το έχουν εξετάσει προσεκτικά στα δεδομένα.

Ο Alan Fix επανεξέτασε το σχεδιασμό και τα επιτεύγματα του πρωτοκόλλου PAVE 100, μια κλινική δοκιμή φάσης 2Β ενός εμβολίου πολυπεπτιδίου DNA-Ad5 HIV σε 8.500 συμμετέχοντες μικτού κινδύνου στην Ανατολική Αφρική, τη Νότια Αφρική και την Αμερική. Η εγγραφή ξεκίνησε το 2003Q3 και τα αποτελέσματα αναμένονται στα τέλη του 2011. Οι ερευνητές συνεχίζουν να συσσωρεύουν δεδομένα ασφαλείας για το σύνταγμα εμβολίων τους από HVTN-204, IAVI-V001 και USMHRP RV-172, και μέχρι σήμερα δεν έχουν υπάρξει ανεπιθύμητες ενέργειες σχετιζόμενες με το εμβόλιο. Fix περιγράφει τους τρόπους με τους οποίους οι ερευνητές απάντησαν τα τρία συγκεκριμένα σχόλια AVRS από τη συνεδρίασή του τον Ιανουάριο του 2007

Οι επιπρόσθετες αλλαγές στην εφαρμογή περιλαμβάνουν εκτεταμένη παρακολούθηση για τους μολυσμένους συμμετέχοντες, ένα στατιστικό σχέδιο που περιλαμβάνει ανάλυση ματαιότητας για αμφότερες τις λειτουργίες και αποτελεσματικότητα και ένα 95% διάστημα εμπιστοσύνης με αποτελεσματικότητα άνω του 30% έναντι των σχετικών στελεχών σε κάθε περιοχή.

Σε απάντηση σε ερωτήσεις, η Fix πρόσθεσε ότι το πρωτόκολλο τροφοδοτείται με ισχύ σε κάθε περιοχή ανεξάρτητα. Θα παράσχει μια ενημέρωση στην AVRS τον Αύγουστο σχετικά με τα αναδυόμενα δεδομένα σχετικά με την προϋπάρχουσα ασυλία του Ad5 στην Αφρική. Τα μέλη πρότειναν ότι ο τελικός σχεδιασμός θα πρέπει να περιλαμβάνει όλα τα χαρακτηριστικά που θα χρειαστούν για την επίτευξη άδειας, εάν το εμβόλιο είναι επιτυχές.

Ο Alan Fix επέστρεψε για να αναφέρει ότι πολλά νέα προϊόντα βρίσκονται σε κλινικές δοκιμές, συμπεριλαμβανομένων νέων δοκιμών από την VRC και την SAAVI. Τα στοιχεία αποτελεσματικότητας από το STEP αναμένονται στα μέσα του 2009, από το HVTN στα τέλη του 2010 και από το PAVE 100 στα τέλη του 2011.

Ο Jim Bradac ανέφερε σχετικά με συμβάσεις και προκλινικές δραστηριότητες. Ειδικότερα, οι ομάδες σχεδιασμού και ανάπτυξης εμβολίων HIV δεν ζητήθηκαν το 2007, αλλά θα επιλυθούν το 2008. Η βάση δεδομένων HIV στο Los Alamos έχει ανανεωθεί και το κοινό πρόγραμμα DAIDS-DAIT στην ανοσολογία Β κυττάρων εκκρεμεί. Οι μονάδες αξιολόγησης εμβολίων για τα εμβόλια Simian (SVEU) υποστηρίζουν επί του παρόντος 190 ζώα, με χωρητικότητα 600-700, προς υποστήριξη σειράς προκαταρκτικών και συγκριτικών μελετών εμβολίων. Ο αγωγός εμβολίων είναι σχετικά πλήρης, με πέντε προκλινικούς υποψήφιους να εισέλθουν σε κλινικές δοκιμές το 2007/2008 και τρεις ακόμη μετά το 2008.

Η συνάντηση έσπασε στις 4:30 μ.μ. και συνέβη το επόμενο πρωί στις 8:30 π.μ.

Ο Jim Bradac υπενθύμισε στους συμμετέχοντες ότι το HIVRAD ιδρύθηκε το 1999 για να απαντήσει σε ερωτήσεις σημαντικές για την έρευνα και ανάπτυξη του εμβολίου HIV σε τομείς όπως ζωικά μοντέλα, δομή ανοσογόνου, μηχανισμό δράσης και ανάπτυξη φορέα. Το πρόγραμμα χορηγεί P01 υποτροφίες για 5 χρόνια από $ 1 έως $ 2 εκατομμύρια / έτος, συνήθως ένα ή δύο βραβεία κάθε χρόνο. Έχουν χορηγηθεί συνολικά 18 επιχορηγήσεις. 4 έχουν ολοκληρωθεί, 12 είναι σήμερα ενεργά και 2 νέες επιδοτήσεις έγιναν το 2007. Η συνολική χρηματοδότηση ανήλθε σε 25 εκατομμύρια δολάρια το 2007. Έθεσε τις ακόλουθες ερωτήσεις για τα μέλη του AVRS να εξετάσουν κατά τη διάρκεια των παρουσιάσεων της ημέρας

Ο Shiu-Lok Hu επανεξέτασε τη συνεργασία του HIVRAD, η οποία επιδιώκει να καθορίσει τα χαρακτηριστικά του ιού HIV που θα πρέπει να στοχεύουν τα εμβόλια, ο καλύτερος τρόπος για να προκαλέσει ευρύτητα NAbs στα πρωτογενή στελέχη και ο καλύτερος τρόπος για τη βελτιστοποίηση της ανοσοποίησης “prime-boost”. Επιδιώκει αυτούς τους στόχους μέσω τεσσάρων αλληλένδετων βασικών έργων

Σε απάντηση σε ερωτήσεις, ο Χου εξήγησε ότι οι ΝΗΠ χορηγούνται ενδομυϊκά, ενισχυμένα με το δέρμα και ενδοστοματικά. Τα προκαταρκτικά δεδομένα υποδηλώνουν ότι τα χαρακτηριστικά του μεταδιδόμενου ιού μπορεί να είναι συγκεκριμένα, με ελάχιστη συχνότητα μεταξύ των κυττάρων. Ο μηχανισμός επιχορήγησης P01 προσφέρει εφοδιαστική ευελιξία, αλλά ενθαρρύνει επίσης την επιστημονική διασταυρούμενη συζήτηση. Από την άλλη πλευρά, ένα μεγάλο και πολύπλοκο έργο όπως αυτό απαιτεί πολλή προσπάθεια, και ακόμη και η διαπολιτισμική συζήτηση είναι απαιτητική. Οι εξωτερικοί σύμβουλοι έχουν συμβουλέψει την ομάδα να μετατοπίσει τους πόρους από τα ΝΗΠ σε κουνέλια.

Το Indresh Srivastava περιγράφει το έργο του που χρηματοδοτείται από το πρόγραμμα HIVRAD, το οποίο επικεντρώνεται σε δύο βασικές δραστηριότητες

Σε απάντηση σε ερωτήσεις, η Srivastava εξήγησε ότι το σκεπτικό για την απογλυκολίωση ήταν να προσδιοριστεί εμπειρικά ποια σάκχαρα εμποδίζουν την πρόσβαση στις θέσεις δέσμευσης. Ο στόχος είναι να προσδιοριστεί πειραματικά εάν οι υποδοχείς χημειοκίνης θα εξουδετερώνουν το πρωτογενές προϊόν απομόνωσης. μέχρι στιγμής, το bs12 δεν φαίνεται τόσο σημαντικό όσο το E51, και μπορεί να υπάρχουν καλύτερες θέσεις σύνδεσης σε άλλες περιοχές.

Ο Sean Du επανεξέτασε το έργο του HIVRAD, μια συνεργασία μεταξύ του Ινστιτούτου Ερευνών Scripps και τριών εταιρειών βιοτεχνολογίας, των Aldevron, Maxygen και Monogram Biosciences. Έχει επίσης δύο ερευνητικά έργα που υποστηρίζονται από δύο πυρήνες

Σε απάντηση σε ερωτήσεις, ο Du δήλωσε ότι η τεχνολογία DME μιμείται τη φυσική εξέλιξη του ιού και έχει χρησιμοποιηθεί προηγουμένως για τη μελέτη της εγκεφαλίτιδας των ιπποειδών της Βενεζουέλας, της Ανατολής και της Δύσης, του ιού του δαγκείου και της ηπατίτιδας Β. Οι ερευνητές έχουν αποφύγει τυχόν προκατάληψη προς ένα συγκεκριμένο δομικό σχέδιο. Ο στόχος είναι να δημιουργηθεί δομική βάση για βελτιωμένη ανοσογονικότητα και ο τελικός στόχος είναι ο μεταδιδόμενος ιός. Το μονόγραμμα λειτουργεί επί του παρόντος σε ένα μεταδιδόμενο πάνελ, αλλά δεν μπορεί ακόμη να ταυτοποιηθεί από ανακατεμένες ακολουθίες.

Ο Paul Johnson εξήγησε ότι το ζωντανό εξασθενημένο SIV (LASIV) έχει αποδειχθεί ότι είναι το πιο αποτελεσματικό εμβόλιο στο μοντέλο SIV / μακάκου, παρέχοντας αποστειρωτική προστασία ενάντια στην ενδοφλέβια, πρωκτική και κολπική πρόκληση. Ωστόσο, αυτή η προστασία είναι λιγότερο αποτελεσματική κατά της ετερόλογης πρόκλησης, και η προστασία φαίνεται να είναι εξαρτώμενη από το χρόνο, μειούμενη με εξασθένηση του αρχικού στελέχους του εμβολίου. Προηγούμενες μελέτες του LASIV έχουν περιορισμένο σχεδιασμό, δοκιμές και ισχύ, αφήνοντας ερωτήματα σχετικά με τον ρόλο των αποκρίσεων NAb, τη συνεχιζόμενη διέγερση με Ag, τον τόπο ανοσοποίησης και τις έμφυτες ανοσολογικές αποκρίσεις στη διαμεσολάβηση της προστασίας, καθώς και τον τρόπο προστασίας από ετερόλογη πρόκληση. Συνεπώς, αυτός και οι συνεργάτες του του HIVRAD επιστρέφουν στο LASIV με νέα εργαλεία και τεχνικές που διατίθενται σε τρία κεντρικά ερευνητικά έργα

Σε απάντηση σε ερωτήσεις, ο Johnson πρόσθεσε ότι η ομάδα του συντονίζει τη δουλειά τους με άλλες ομάδες του HIVRAD καθώς και με CHAVI, GHVE κλπ. Υπάρχει πιθανότητα ότι η προστασία μπορεί να μειωθεί εξαιτίας της κλωνικής εξάντλησης, αλλά αυτό θα απαιτούσε 5 έως 7 χρόνια και μόνο να διασαφηνιστεί σε μια μακροχρόνια μελέτη. Τα μοντέλα ΝΗΡ και ποντικού μπορεί να έχουν ελάχιστη χρησιμότητα για τον καθορισμό των συσχετισμών προστασίας στους ανθρώπους, αλλά η έμφαση πρέπει να είναι σε προηγούμενα και νωρίτερα στάδια μόλυνσης. Δεν υπάρχουν ενδείξεις καταστροφής του CD4, αν και μπορεί να υπάρξει κάμψη του CD20. δεν έχουν κάνει ένα πείραμα εξάντλησης του CD8.

Ο Chris Miller περιέγραψε τις προσπάθειες της ομάδας του να βασιστεί στα αποτελέσματα του SIV-μακάκου χρησιμοποιώντας ζωντανά εξασθενημένο SHIV (φάκελο HIV, πυρήνας SIV) για να ανοσοποιηθεί έναντι πρόκλησης SIV. Αυτό το σχέδιο HIVRAD έχει τρία σχέδια για την επίτευξη τριών ειδικών στόχων

Τα αποτελέσματα μέχρι σήμερα έχουν δείξει ότι, σε ΝΗΠ, ο χρόνος της αιχμής της ιαιμίας ποικίλει ανάλογα με την απομόνωση και την πρόκληση. Υπάρχει ένα σαφές όφελος για τον εμβολιασμό, με το 90% των ιστών να παρουσιάζουν δραστηριότητα Τ κυττάρων. Τα ανοσοποιημένα ζώα έχουν μικρότερη αιχμή της ιαιμίας και χαμηλότερο σημείο αναφοράς, αλλά ορισμένα ζώα παραμένουν σχετικά απροστάτευτα. Υπάρχει μικρή απόκριση ΑΒ στους κολπικούς ιστούς, αλλά ο εμβολιασμός προκαλεί πολυλειτουργικά Gag-ειδικά CD8 + Τ κύτταρα στο γεννητικό σύστημα, μαζί με TNF-α, IL-2 και IFN-γ. Η ανταπόκριση στα PBMCS είναι διαφορετική από εκείνη στον ιστό και θα επιδιωχθεί στο μέλλον.

Σε απάντηση σε ερωτήσεις, ο Μίλερ είπε ότι θα χρειαστούν περαιτέρω μελέτες για να διευκρινιστούν τα θέματα μολυσματικότητας. Ωστόσο, ο ιός που μολύνει δεν είναι ο ιός που αργότερα βρέθηκε στο αίμα. Η προγεστερόνη φαίνεται να αυξάνει την προστασία των θηλυκών αλλά μειώνει την προστασία στους άνδρες. Πρέπει να καθοριστούν ακριβείς αλληλεπιδράσεις μεταξύ του τόπου ανοσοποίησης, της οδού πρόκλησης και του επιπέδου προστασίας. Εντούτοις, η ενδοφλέβια πρόκληση φαίνεται ότι παράγει περίπου την ίδια ανταπόκριση με την ενδορινική και ενδοκρυσταλλική – μια αρχική ιογενής “βολή” ακολουθούμενη από μακροπρόθεσμη πρόοδο. Η μεσεντερική πρόκληση είναι τεχνικά δύσκολη και ο Miller ελπίζει ότι άλλες ομάδες θα το επιχειρήσουν.

Ο Hildegund Ertl εξήγησε ότι, μετά την ανακάλυψη, η προϋπάρχουσα ανοσία του Ad5 μπορεί να εμποδίσει την επίδραση εμβολίων HIV με βάση τον ανθρώπινο φορέα Ad5, οι ερευνητές διαπίστωσαν ότι τα εμβόλια με βάση τον αδενοϊό του χιμπατζή (AdC) δεν παρεμποδίστηκαν. Ως αποτέλεσμα, η Ertl και οι συνεργάτες της έλαβαν επιχορήγηση του HIVRAD για την ανάπτυξη φορέων AdC ως φορέων για ανοσογόνα HIV. Έχουν διεξαχθεί εργασίες αρκετών φορέων – AdC68, AdC6, AdC7 και AdC1 / C5 – που δείχνουν ότι δεν επηρεάζονται από προϋπάρχουσα ανοσία Ad5, προκαλούν καλή ανταπόκριση Τ κυττάρων σε ανθρώπους (αλλά ασθενέστερη απόκριση κυττάρων Β από Ad5), μπορούν να ενισχυθούν για να στοχεύσουν στην γεννητική οδό και όχι στο έντερο και προκαλούν την αποτελεσματικότητα της δενδριτικής κυτταρικής ωρίμανσης από τους φορείς Ad5. Επειδή ο φορέας AdC επιμένει στους ανθρώπους, υπάρχει μια ικανοποιητική ανταπόκριση των κυττάρων CD8 + Τ στο ήπαρ, τον σπλήνα και τους μυς. Συγκριτικές μελέτες έχουν δείξει ότι η αποτελεσματικότητα εξαρτάται από τη θεραπεία βασικής ώθησης, αλλά η ώθηση Ad5 prime + AdC παρέχει καλύτερη ανοσοαπόκριση από Ad5 + Ad5. Τα μελλοντικά σχέδια περιλαμβάνουν μια τελική δοκιμή NHP για τη σύγκριση του AdC7 + AdC6 με AdC6 + AdC7, μια δοκιμή κλιμάκωσης δόσης Phase 1 με AdC6 gag και AdC7gag και μια δοκιμή πρώτης ώρας Phase 2 με AdC6 και AdC7 που δόθηκαν δύο φορές. Οι ερευνητές θα συνεχίσουν να μελετούν τη βιολογία των φορέων AdC, συμπεριλαμβανομένης της ικανότητας αντιγραφής έναντι ελαττωματικής αντιγραφής.

Σε απάντηση σε ερωτήσεις, ο Ertl είπε ότι οι ερευνητές δεν είναι σε θέση να εξηγήσουν την επιμονή των φορέων AdC. Δεν φαίνεται να προέρχεται από την αναπαραγωγή ή τον ανασυνδυασμό, και σε κάθε περίπτωση είναι κάτω από το επίπεδο θάρρος που ανησυχεί.

Ο Φρεντ Φράνκελ επανεξέτασε τις προσπάθειες της εταιρικής σχέσης του HIVRAD για την αξιολόγηση των στρατηγικών εμβολιασμού για εξασθενημένα εμβόλια κατά του Listeria monocytogenes (LM) σε ποντικούς και ΝΗΡ. Τα ζώα ανοσοποιήθηκαν τρεις φορές (εβδομάδες 1, 6 και 19) είτε από το στόμα ή από στόματος πρωταρχική + ενδομυϊκή (IM) ώθηση και ακολούθησαν την εβδομάδα 36. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι το εμβόλιο είναι ασφαλές σε πιθήκους Rhesus, χωρίς βιώσιμους οργανισμούς καμία διάρροια. Η στοματική ανοσοποίηση παρήγαγε αποκρίσεις Τ κυττάρων, ενώ από το στόμα + ΙΜ προκλήθηκε Abs αλλά όχι Τ κύτταρα. Η συνολική απόκριση Τ κυττάρων ήταν ασθενής, ακόμη και όταν το πείραμα επαναλήφθηκε με ικανά για την αντιγραφή και ενισχυμένα με έκφραση στελέχη LM. Το DNA prime + LM ώθηση παράγει μια πολύ μεγαλύτερη ανοσολογική απόκριση και δεν υπάρχει κανένα σημάδι από του στόματος ανοχής.

Σε απάντηση σε ερωτήσεις, ο Frankel είπε ότι οι ερευνητές δεν έχουν πειραματιστεί ακόμα με πολυγονιδιακούς φορείς, αν και εργάζονται επί του παρόντος για τα ανοσογόνα tat, nef και gp120. Σε ποντίκια, το LM prime + Ad5 ώθηση παρήγαγε το μεγαλύτερο κολπικό αποτέλεσμα, ιδιαίτερα όταν η ώθηση και όχι η πρωταρχική είναι κολπική. Αυτό το καθεστώς παράγει gag-ειδικά CD8 + Τ τελεστές κύτταρα που επιμένουν ως κύτταρα μνήμης. Αυτά τα πειράματα επαναλήφθηκαν σε ΝΗΡ με τα ίδια αποτελέσματα και με προστασία έναντι πρόκλησης SIV.

Ο David Knipe περιέγραψε τις προσπάθειες της ομάδας του HIVRAD να αναπτύξει τον ανασυνδυασμένο ιό απλού έρπητα (rHSV) ως φορέα για το εμβόλιο HIV και να αξιολογήσει τις ανοσολογικές αποκρίσεις και την προστασία σε NHP ανοσοποιημένο με rHSV. Η μόλυνση με τον ιό του απλού έρπητα 2 (HSV-2) είναι σημαντικός παράγοντας κινδύνου για την απόκτηση του HIV, αλλά ο ελαττωματικός με αντιγραφή HSV θα μπορούσε να παράσχει έναν ασφαλή και επίμονο φορέα για ένα εμβόλιο HIV, λόγω του υψηλού επιπέδου έκφρασης ξένου γονιδίου και ευρέως τροπισμού. Σε μια πρώιμη μελέτη, οι μακάκοι rhesus που ανοσοποιήθηκαν με φορείς HSV-1 που εκφράζουν SIV env και nef δεν έδειξαν ανιχνεύσιμο SIV RNA μετά από πρωκτική πρόκληση με SIV πέντε μήνες μετά την ανοσοποίηση. Σε μια δεύτερη μελέτη, rHSV-2 που περιέχει τη μετάλλαξη d106 (έξι άμεσα και πρώιμα γονίδια) εκφράζει ακόμα λιγότερες HSV πρωτεΐνες διατηρώντας παράλληλα υψηλή έκφραση διαγονιδίων SIV προκαλώντας ανοσοαπόκριση που μειώνει το ιικό φορτίο σε προκληθέν NHP. Η επόμενη μελέτη, χρησιμοποιώντας την ενίσχυση DNA + rHSV, παρήγαγε στιβαρή αντι-Gag και αντι-Εην κυτταρικές αποκρίσεις και σημαντικά χαμηλότερα ιικά φορτία σε ανοσοποιημένο ΝΗΡ. Οι ανοσοποιητικοί προγνωστικοί παράγοντες του ιϊρεμικού ελέγχου ήταν μέγεθος αντι-SIV NAbs κατά τη διάρκεια της φάσης του εμβολίου, παρουσία αντι-Rev Τ κυττάρων την ημέρα πρόκλησης και ταχεία απόκριση αντι-Tat Τ κυττάρου μετά από πρόκληση. Η τρέχουσα μελέτη συγκρίνει τέσσερις βασικές αγωγές ενίσχυσης + DNA και d106-rHSV-2 σε έξι NHP το καθένα, χρησιμοποιώντας δύο πρώτες (εβδομάδες 0 και 4) δύο ενισχύσεις (εβδομάδες 12 και 24) και πρόκληση SIV την εβδομάδα 36. Προκαταρκτικά αποτελέσματα παράλληλα αυτές των μικρότερων μελετών – ανοσολογικές αντιδράσεις και από τα τέσσερα καθεστώτα, αλλά η ομάδα DNA + HSV έδειξε το υψηλότερο μέγεθος κυτταρικής ανοσολογικής απόκρισης, συν την ασθενή δραστικότητα εξουδετέρωσης και την επαγωγή αποκρίσεων λεμφαδένων, CD8 + Τ κυττάρων κεντρικής μνήμης. Παραμένει να δούμε πώς αυτές οι διαφορές στην ανοσολογική απόκριση καταδεικνύουν το αποτέλεσμα μετά την πρόκληση SIV.

Οι συμμετέχοντες εξέφρασαν την ικανοποίησή τους για το γεγονός ότι η HIVRAD επιτυγχάνει τους στόχους της, επιδιώκει την υποσχόμενη έρευνα σε σημαντικούς επιστημονικούς τομείς και ενθαρρύνει τις πολύτιμες ανταλλαγές πληροφοριών μεταξύ των ερευνητών του HIV. Πρότειναν ότι θα ήταν χρήσιμο μια ομάδα ερευνητών του HIVRAD να παρουσιάσουν στην AVRS κάθε έξι μήνες, να προσκληθούν οι παρουσιαστές να παρακολουθήσουν και τις δύο μέρες της συνάντησης και ότι το τμήμα του HIVRAD έχει επιστημονική εστίαση (π.χ. ζωντανά εξασθενημένα εμβόλια) . Εναλλακτικά, η AVRS θα μπορούσε να υποστηρίξει συνεδριάσεις με επίκεντρο θεμάτων μεταξύ των ερευνητών του HIVRAD. Είναι επίσης επιθυμητή η αλληλοεπικάλυψη μεταξύ των ερευνητών του CHAVI και του HIVRAD. Είναι δύσκολο να δημιουργηθούν και να διατηρηθούν διαδραστικές ομάδες. Ο HIVRAD και άλλοι μηχανισμοί διαχρονικής χρηματοδότησης είναι μια μεγάλη βοήθεια. Οι χορηγοί πρέπει επίσης να είναι υπομονετικοί και εύλογοι – όχι όλα αυτά τα προγράμματα θα οδηγήσουν σε κλινικές δοκιμές, αλλά όλα αυτά είναι πολύτιμα.

Η συνεδρίαση διακόπτεται στις 1:00 μ.μ.